Objetivo: utilizar as precauções universais pela equipe de enfermagem em isolamento de pacientes em hospital universitário. métodos: estudo descritivo, prospectivo. foram utilizados dados da assessoria de controle de qualidade da assistência de enfermagem, correspondentes aos relatórios das observações das precauções universais em isolamento de pacientes em duas unidades de internação médica – cirúrgica, no período entre 2008 e 2010.