Os testes ELISA da quarta geração conseguem identificar a presença de antígenos e anticorpos em determinada amostra.

Em sua fase sólida possui anticorpos contra antígenos do HIV-1 e HIV-2, do grupo O e o antígeno p24.

Em uma amostra, os anticorpos são detectados quando são adicionadas proteínas recombinantes e peptídeos sintéticos do HIV, conjugados com uma enzima. Já a detecção do antígeno é indicada pela imunoglobulina anti-ps24 conjugada a uma enzima.